CN108379135A - 一种紫芝提取物的组合物及其提取工艺和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种紫芝提取物的组合物及其提取工艺和应用；所述组合物包含水相紫芝提取物和油相紫芝提取物；其中，所述水相紫芝提取物的重量份数为0.5‑15份，所述油相紫芝提取物的重量份数为0.1‑5份；本发明通过优化提取工艺，最大化的提取出紫芝中的精华成分，并将水相和油相提取物合理搭配，得到的组合物添加至化妆品中，两种组分在特定配比下能够修饰肌肤并起到明显的抗衰老效果，具有广阔的应用前景和巨大的市场价值；本发明工艺简单，可实现工业化大规模生产，可为企业带来良好的经济效益，具备广阔的前景。

Description

一种紫芝提取物的组合物及其提取工艺和应用
技术领域
本发明涉及化妆品领域，主要涉及一种紫芝提取物的组合物及其提取工艺和应用。
背景技术
现代科学证明，灵芝作为我国传统的名贵菌类药材，有广泛的药理作用和多种保健价值，目前从灵芝中分离出来的成分超过150种，其主要的生理活性物质为多糖类、三萜类、油脂类、蛋白类、生物碱类、甾醇类等，特别是灵芝多糖和灵芝孢子油具有抗肿瘤、免疫调节、抗氧化、抗衰老、抗炎症及降血糖血脂功能广受青睐，广泛用于食品、药品和保健品中。紫芝，是灵芝的一种，《神农本草经》把紫芝列为灵芝中的上品，其抗衰和养生功效也是灵芝中最显著的。
中国发明专利申请号201711061167.9，发明名称为“一种含有灵芝提取物的抗衰老、净白组合物及其制备方法”公开了一种含有灵芝的抗衰老组合物，该组合物具有一定的抗衰和美白效果，但该提取组合物并没有把灵芝原料的功效合理利用最大化，造成了原料的浪费。中国发明专利申请号201410219028.4，发明名称为“一种灵芝抗衰老面霜及其制备方法”公开了一种抗衰老面霜的制备，该产品分别使用了水提法和超临界CO2萃取法，有区别的提取出了灵芝中的精华成分，但这两种方式的提取率不高，也不能将灵芝精华有效利用。
综上所述，现有技术对紫芝提取物的提取工艺及应用方式尚不完善，有待提高，因此，研发一种高效提取紫芝中的有效成分的工艺，将其适量添加至化妆品中以发挥紫芝提取物的功效，具有广阔的应用前景和市场价值。
发明内容
针对现有技术的不足和市场的需求，本发明提供了一种紫芝提取物的组合物及其提取工艺和应用，通过优化提取工艺，最大化的提取出紫芝中的精华成分，并将水相和油相提取物合理搭配，得到的组合物添加至化妆品中，在修饰肌肤的同时起到明显的抗衰老效果，具有广阔的应用前景和巨大的市场价值。
第一方面，本发明提供一种紫芝提取物的组合物，所述组合物包含水相紫芝提取物和油相紫芝提取物；
其中，所述油相紫芝提取物的重量份数为0.1-5份，所述水相紫芝提取物的重量份数为0.5-15份。
本发明中，发明人在长期生产研究过程中，深入挖掘传统中药中能够延缓衰老的有效种类，以名贵菌类药材灵芝为出发点，寻找到灵芝中抗衰养生功效最为显著的紫芝作为抗衰活性组分的提取原料，分别提取出油相孢子油和水相灵芝多糖，优化两种提取物的组分配比，发现在上述配比下二者相互协同发挥卓越的抗衰老功效。
优选地，所述油相紫芝提取物的重量份数为0.1-5份，例如可以是0.1份、0.5份、1份、2份、3份、4份或5份。
优选地，所述水相紫芝提取物的重量份数为0.5-15份，例如可以是0.5份、1份、2份、3份、4份、5份、6份、7份、8份、9份、10份、11份、12份、13份、14份或15份。
第二方面，本发明提供一种提取如第一方面所述水相紫芝提取物的方法，包括如下步骤：
(1)预处理：取紫芝子实体，粉碎过筛后待用；
(2)乙醇回流：将步骤(1)得到的粉末加入乙醇中进行回流提取，离心得到沉淀并干燥；
(3)超声提取：将步骤(2)得到的粉末加入水中进行超声提取，离心去除沉淀后浓缩滤液至滤液与初始紫芝粉末的重量比为1:(1-10)，得到水相紫芝提取物。
优选地，步骤(1)所述过筛的目数为20-100目，例如可以是20目、30目、40目、50目、60目、70目、80目、90目或100目。
优选地，步骤(2)所述乙醇的体积浓度为50-95％，例如可以是50％、60％、70％、80％、90％或95％。
优选地，步骤(2)所述回流提取的料液比为1:(1-10)，例如可以是1:1、1:3、1:5、1:7、1:9或1:10。
优选地，步骤(2)所述回流提取的温度为40-70℃，例如可以是40℃、50℃、60℃或70℃。
优选地，步骤(2)所述回流提取的次数为1-3次，例如可以是1次、2次或3次。
优选地，步骤(2)所述回流提取的时间为每次1-3小时，例如可以是1小时、2小时或3小时。
优选地，步骤(2)所述干燥的温度为40-70℃，例如可以是40℃、50℃、60℃或70℃。
优选地，步骤(3)所述超声的功率为200-800W，例如可以是200W、300W、400W、500W、600W、700W或800W。
优选地，步骤(3)所述超声提取的料液比为1:(10-20)，例如可以是1:10、1:12、1:14、1:16、118或1:20。
优选地，步骤(3)所述超声提取的温度为30-60℃，例如可以是30℃、35℃、40℃、45℃、50℃、55℃或60℃。
优选地，步骤(3)所述超声提取的时间为20-60分钟，例如可以是20分钟、30分钟、40分钟、50分钟或60分钟。
优选地，步骤(3)所述浓缩的温度为30-50℃，例如可以是30℃、35℃、40℃、45℃或50℃。
第三方面，本发明提供一种提取如第一方面所述油相紫芝提取物的方法，包括如下步骤：
(1’)取紫芝孢子，进行脆化破壁；
(2’)将步骤(1’)破壁后的孢子粉进行超微粉碎破壁后过筛；
(3’)将步骤(2’)得到的孢子粉进行超临界CO2萃取，收集得到油相紫芝提取物。
优选地，步骤(1’)所述脆化破壁的蒸汽压力为0.4-0.6MPa，例如可以是0.4MPa、0.5MPa或0.6MPa。
优选地，步骤(1’)所述脆化破壁的蒸汽温度为80-100℃，例如可以是80℃、85℃、90℃、95℃或100℃。
优选地，步骤(1’)所述脆化破壁的时间为0.5-1.5小时，例如可以是0.5小时、1小时或1.5小时。
优选地，步骤(2’)所述超微粉碎的时间为30-60min，例如可以是30min、35min、40min、45min、50min、55min或60min。
优选地，步骤(2’)所述过筛的目数为80-200目，例如可以是80目、90目、100目、110目、120目、130目、140目、160目、180目或200目。
优选地，步骤(3’)所述萃取的温度为20-50℃，例如可以是20℃、30℃、40℃或50℃。
优选地，步骤(3’)所述萃取的压力为10-30MPa，例如可以是10MPa、15MPa、20MPa、25MPa或30MPa。
优选地，步骤(3’)所述萃取的时间为1-4小时，例如可以是1小时、2小时、3小时或4小时。
优选地，步骤(3’)所述收集的CO2流量为5L/h-50L/h，例如可以是5L/h、10L/h、20L/h、30L/h、40L/h或50L/h。
第四方面，本发明提供一种如第一方面所述的紫芝提取物的组合物用于制备抗衰老化妆品的用途。
第五方面，本发明提供一种化妆品，所述化妆品含有如第一方面所述的紫芝提取物的组合物；
优选地，所述化妆品包括乳液、面霜、粉底液、洁面乳、化妆水或BB霜中的任意一种或至少两种的组合，优选为BB霜。
目前，将灵芝多糖和灵芝孢子油同时应用与化妆品中的情况并不多见，将紫芝作为抗衰老成分用于BB霜类产品中的还未有报道。本发明选用紫芝成分，通过优化不同的提取方式，分别提取出水相提取物和油相提取物，与其他原料合理复配制备成BB霜，本发明的提取工艺能有效提高紫芝原料的利用率，在遮瑕、提亮、美颜的同时还具有明显的抗衰老效果。
优选地，所述BB霜中紫芝提取物的组合物的重量百分比为1-15％，例如可以是1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％、13％、14％或15％。
其中，油相紫芝提取物的添加量为0.1-3％，水相紫芝提取物的添加量为0.5-15％。
优选地，所述BB霜按重量份数包括润肤剂5-25份，保湿剂5-15份，乳化剂1-5份，增稠剂0.05-0.5份，稳定剂0.1-2份、粉质类2-10份和紫芝提取物的组合物2-10份。
优选地，所述润肤剂的重量份数为5-25份，例如可以是5份、7份、9份、11份、13份、15份、17份、19份、21份、23份或25份。
优选地，所述保湿剂的重量份数为5-15份，例如可以是5份、7份、9份、11份、13份或15份。
优选地，所述乳化剂的重量份数为1-5份，例如可以是1、2、3、4或5份。
优选地，所述增稠剂的重量份数为0.05-0.5份，例如可以是0.05份、0.1份、0.2份、0.3份、0.4份或0.5份。
优选地，所述稳定剂的重量份数为0.1-2份，例如可以是0.1份、0.2份、0.5份、0.7份、0.9份、1份、1.3份、1.5份、1.7份或2份。
优选地，所述粉质类的重量份数为2-10份，例如可以是2份、3份、4份、5份、6份、7份、8份、9份或10份。
优选地，所述紫芝提取物组合物的重量份数为2-10份，例如可以是2份、3份、4份、5份、6份、7份、8份、9份或10份。
优选地，所述润肤油包括矿油、辛酸/癸酸甘油三酯、氢化聚异丁烯、碳酸二辛酯、鲸蜡醇乙基己酸酯、辛基聚甲基硅氧烷、异构十六烷、聚二甲基硅氧烷、环聚二甲基硅氧烷、环五聚二甲基硅氧烷或季戊四醇四异硬脂酸酯中的三种或三种以上的混合物。
优选地，所述乳化剂包括PEG-10聚二甲基硅氧烷、聚甘油-2二聚羟基硬脂酸酯、鲸蜡基PEG/PPG-10/1聚二甲基硅氧烷、PEG-30二聚羟基硬脂酸酯、聚甘油-3二异硬脂酸酯、聚甘油-2油酸酯或甘油异硬脂酸酯中的任意一种或至少两种的组合。
优选地，所述粉质类包括二氧化钛、氧化锌、云母、滑石粉、氧化铁黄、氧化铁红或氧化铁黑中的至少四种的组合。
优选地，所述稳定剂包括硫酸镁、氯化钠或硬脂酸镁中的任意一种或至少两种的组合。
优选地，所述保湿剂包括甘油、丁二醇、双丙甘醇、1，3-丙二醇、木糖醇、脱水木糖醇、甘油聚醚-26、透明质酸钠、海藻糖或甜菜碱中的任意一种或至少两种的组合。
优选地，所述胶质原料包括黄原胶、阿拉伯胶树胶、羟丙基淀粉磷酸酯、羧甲基纤维素、羟乙基纤维素或聚丙烯酸酯交联聚合物-6中的任意一种或至少两种的组合。
优选地，所述化妆品还包括皮肤调理剂、螯合剂、抗氧化剂、防腐剂或香精中的任意一种或至少两种的组合。
与现有技术相比，本发明具有如下优点：
(1)本发明提供的提取工艺提取率高，能将紫芝原料的功效成分利用最大化，可有效缩短提取时间，便于扩大进行工艺生产，还可减少有害溶剂的使用。同时，整个提取过程中无需高温，避免了因高温对活性物分子结构的破坏，保持紫芝的生物活性，是一种较理想的紫芝提取新工艺，有利于推广应用；
(2)将本发明的紫芝提取物的组合物用于BB霜中可有效遮盖脸部瑕疵，提亮肤色；产品可长效保持皮肤水分，缓解皮肤干燥，使皮肤柔滑细嫩；其还有淡化细纹，恢复肌肤弹性，增强皮肤的光泽度和光滑度的抗衰老功效。
具体实施方式
为更进一步阐述本发明所采取的技术手段及其效果，以下结合本发明的优选实施例来进一步说明本发明的技术方案，但本发明并非局限在实施例范围内。
实施例1具有抗衰老功效的紫芝提取物Ⅰ及其制备方法
水相提取物
(1)预处理
取紫芝子实体，除去杂质及木屑，用去离子水洗净，在50℃烘至完全干燥为止，粉粹，过80目筛，保存待用；
(2)提取
将紫芝粉末加入到体积浓度为75％的乙醇中，提取料液比为1:5，在60℃条件下回流提取3次，每次3h，离心去除上清液，沉淀在50℃条件下真空干燥；
将干燥的紫芝粉末投入去离子水中，用超声提取法提取，控制超声功率为600W，提取料液比为1:15，提取温度为40℃，提取时间为40分钟；
将上述提取液离心去除沉淀，合并滤液，在50℃减压浓缩至药液与初始紫芝粉末的重量比为1:5，得到具有抗衰老功效的水相紫芝提取物；
2、油相提取物
(1)预处理
取紫芝孢子，在50℃烘至完全干燥，保存待用；
(2)脆化破壁
将紫芝孢子使用膨化设备脆化破壁，控制压力罐中的蒸汽压力控制为0.4MPa，蒸汽温度控制为80℃，保持该压力和温度1h，打开压力罐与真空罐之间的阀门，利用瞬间的变温、压差将灵芝孢子脆化、干燥；
(3)超微粉碎
取出压力罐中己脆化、干燥的灵芝孢子粉进行超微粉碎破壁40min，将粉碎后的孢子粉过80目筛；
(4)萃取
将预处理后的灵芝孢子粉使用超临界CO2萃取方式，萃取温度为30℃，萃取压力为20Mpa，萃取时间为2小时，收集CO2流量为20L/h，收集所得灵芝孢子油，得到具有抗衰老功效的油相紫芝提取物。
实施例2具有抗衰老功效的紫芝提取物Ⅱ及其制备方法
1、水相提取物
(1)预处理
取紫芝子实体，除去杂质及木屑，用去离子水洗净，在50℃烘至完全干燥为止，粉粹，过100目筛，保存待用；
(2)提取
将紫芝粉末加入到体积浓度为95％的乙醇中，提取料液比为1:10，在60℃条件下回流提取2次，每次3h，离心去除上清液，沉淀在50℃条件下真空干燥。
将干燥的紫芝粉末投入去离子水中，用超声提取法提取，控制超声功率为500W，提取料液比为1：15，提取温度为60℃，提取时间为45分钟；
将上述提取液离心去除沉淀，合并滤液，在50℃减压浓缩至药液与初始紫芝粉末重量比为1:5，得到具有抗衰老功效的水相紫芝提取物；
2、油相提取物
(1)预处理
取紫芝孢子，在50℃烘至完全干燥，保存待用；
(2)脆化破壁
将紫芝孢子使用膨化设备脆化破壁，控制压力罐中的蒸汽压力控制为0.6MPa，蒸汽温度控制为100℃，保持该压力和温度1h，打开压力罐与真空罐之间的阀门，利用瞬间的变温、压差将灵芝孢子脆化、干燥；
(3)超微粉碎
取出压力罐中己脆化、干燥的灵芝孢子粉进行超微粉碎破壁50min，将粉碎后的孢子粉过80目筛；
(4)萃取
将预处理后的灵芝孢子粉使用超临界CO2萃取方式，萃取温度为30℃，萃取压力为30Mpa，萃取时间为2小时，收集CO2流量为30L/h，收集所得灵芝孢子油，得到具有抗衰老功效的油相紫芝提取物。
实施例3具有抗衰老功效的紫芝提取物Ⅲ及其制备方法
1、水相提取物
(1)预处理
取紫芝子实体，除去杂质及木屑，用去离子水洗净，在50℃烘至完全干燥为止，粉粹，过90目筛，保存待用；
(2)提取
将紫芝粉末加入到体积浓度为85％的乙醇中，提取料液比为1:6，在70℃条件下回流提取2次，每次2h，离心去除上清液，沉淀在60℃条件下真空干燥。
将干燥的紫芝粉末投入去离子水中，用超声提取法提取，控制超声功率为600W，提取料液比为1:20，提取温度为60℃，提取时间为40分钟；
将上述提取液离心去除沉淀，合并滤液，在50℃减压浓缩至药液与初始紫芝粉末重量比为1:10，得到具有抗衰老功效的水相紫芝提取物；
2、油相提取物
(1)预处理
取紫芝孢子，在50℃烘至完全干燥，保存待用；
(2)脆化破壁
将紫芝孢子使用膨化设备脆化破壁，控制压力罐中的蒸汽压力控制为0.6MPa，蒸汽温度控制为100℃，保持该压力和温度1h，打开压力罐与真空罐之间的阀门，利用瞬间的变温、压差将灵芝孢子脆化、干燥；
(3)超微粉碎
取出压力罐中己脆化、干燥的灵芝孢子粉进行超微粉碎破壁30min，将粉碎后的孢子粉过100目筛；
(4)萃取
将预处理后的灵芝孢子粉使用超临界CO2萃取方式，萃取温度为30℃，萃取压力为30Mpa，萃取时间为2小时，收集CO2流量为30L/h，收集所得灵芝孢子油，得到具有抗衰老功效的油相紫芝提取物。
实施例4保湿抗衰BB霜
一种保湿抗衰BB霜的配方见表1。
表1
制备方法如下：
(1)将C组分用适量A组分的液体油脂过胶体磨研磨，使粉完全浸润后投入到乳化锅；
(2)将剩余A组分投入到乳化锅，加热至80℃搅拌分散均匀，作为油相；
(3)将B组分原料加热至80℃溶解分散均匀，待用；
(4)将B组分在搅拌条件下缓慢匀速加入到油相中，加入完毕后，均质速度3000-6000rpm下乳化3-5分钟；
(5)降温到40℃将D组分加入乳化锅，均质速度1000～6000rpm下乳化1-3分钟；
(6)搅拌均匀，抽真空，降温到35℃出料，即可。
实施例5抗衰出水BB霜
一种具有出水效果的抗衰BB霜的配方见表2。
表2
制备方法如下：
(1)将C组分用适量A组分的油脂过胶体磨研磨，使粉完全浸润后投入到乳化锅；
(2)将剩余A组分投入到乳化锅，搅拌分散均匀，作为油相；
(3)将B组分原料常温下溶解分散均匀，待用；
(4)将B组分在搅拌条件下缓慢匀速加入到油相中，加入完毕后，均质速度1000-6000rpm下再乳化3-5.0分钟；
(5)降温到40℃将D组分加入乳化锅，搅拌均匀；
(6)搅拌均匀，抽真空，降温到35℃出料，即可。
实施例6美白抗衰BB霜
一种美白抗衰BB霜的配方见表3；
表3
制备方法如下：
(1)将C组分用适量A组分的液体油脂过胶体磨研磨，使粉完全浸润后投入到乳化锅；
(2)将剩余A组分投入到乳化锅，加热至80℃搅拌分散均匀，作为油相；
(3)将B组分原料加热至80℃溶解分散均匀，待用；
(4)将B组分在搅拌条件下缓慢匀速加入到油相中，加入完毕后，均质速度3000-6000rpm下乳化3-5分钟；
(5)降温到40℃将D组分加入乳化锅，均质速度1000-6000rpm下乳化1-3分钟；
(6)搅拌均匀，抽真空，降温到35℃出料，即可。
实施例7
与实施例4相比，除了具有抗衰老功效的紫芝提取物Ⅰ(油相)和具有抗衰老功效的紫芝提取物Ⅰ(水相)改为具有抗衰老功效的紫芝提取物Ⅲ(油相)具有抗衰老功效的紫芝提取物Ⅲ(水相)外，其他条件与实施例4相同。
实施例8
与实施例5相比，除了具有抗衰老功效的紫芝提取物Ⅱ(油相)的添加量改为0.1％，具有抗衰老功效的紫芝提取物Ⅱ(水相)的添加量改为0.9％外，其他条件与实施例5相同。
实施例9
与实施例5相比，除了具有抗衰老功效的紫芝提取物Ⅱ(油相)的添加量改为3％，具有抗衰老功效的紫芝提取物Ⅱ(水相)的添加量改为12％外，其他条件与实施例5相同。
实施例10
与实施例5相比，除了具有抗衰老功效的紫芝提取物Ⅱ(油相)的添加量改为0.5％，具有抗衰老功效的紫芝提取物Ⅱ(水相)的添加量改为0.5％外，其他条件与实施例5相同。
实施例11
与实施例5相比，除了具有抗衰老功效的紫芝提取物Ⅱ(油相)的添加量改为0.1％，具有抗衰老功效的紫芝提取物Ⅱ(水相)的添加量改为14.9％外，其他条件与实施例5相同。
对比例1常规的紫芝提取方式
水相提取物
(1)预处理
取紫芝子实体，除去杂质及木屑，用去离子水洗净，在50℃烘至完全干燥为止，粉粹，过100目筛，用体积浓度为95％乙醇浸泡除脂，料液比为1:1，浸泡时间为2小时，清洗后烘干待用；
(2)提取
使用90℃的去离子水浸提，料液比为1:20，浸提时间为2小时；
将上述提取液离心去除沉淀，合并滤液，在50℃减压浓缩至药液与初始紫芝粉末百分比为1：5，得到具有抗衰老功效的水相紫芝提取物。
油相提取物
(1)预处理
取紫芝孢子，在50℃烘至完全干燥，保存待用；
(2)酸化破壁
取灵芝孢子粉加入浓度为5％的盐酸中，料液比为1:5，在80℃水浴加热条件下持续搅拌1小时，转速控制为500r/min，之后在-18℃速冷30min，循环3次；
(3)提取
过滤后用无水乙醇清洗，烘干后将破壁的孢子加入石油醚，料液比为1:1，超声振荡30min收集有机层，加热使有机溶剂挥发，具有抗衰老功效的油相紫芝提取物。
对比例2不含有紫芝提取物的普通BB霜
一种不含有紫芝提取物的普通BB霜的配方见表4；
表4
制备方法如下：
(1)将C组分用适量A组分的液体油脂过胶体磨研磨，使粉完全浸润后投入到乳化锅；
(2)将剩余A组分投入到乳化锅，加热至80℃搅拌分散均匀，作为油相；
(3)将B组分原料加热至80℃溶解分散均匀，待用；
(4)将B组分在搅拌条件下缓慢匀速加入到油相中，加入完毕后，均质速度3000-6000rpm下乳化3-5分钟；
(5)降温到40℃将D组分加入乳化锅，均质速度1000-6000rpm下乳化1-3分钟；
(6)搅拌均匀，抽真空，降温到35℃出料，即可。
对比例3一种不含有紫芝提取物的普通美白BB霜
一种不含有紫芝提取物的普通美白衰BB霜的配方见表5；
表5
制备方法如下：
(1)将C组分用适量A组分的液体油脂过胶体磨研磨，使粉完全浸润后投入到乳化锅；
(2)将剩余A组分投入到乳化锅，加热至80℃搅拌分散均匀，作为油相；
(3)将B组分原料加热至80℃溶解分散均匀，待用；
(4)将B组分在搅拌条件下缓慢匀速加入到油相中，加入完毕后，均质速度3000-6000rpm下乳化3-5分钟；
(5)降温到40℃将D组分加入乳化锅，均质速度1000-6000rpm下乳化1-3分钟；
(6)搅拌均匀，抽真空，降温到35℃出料，即可。
对比例4
与实施例5相比，除了不添加水相紫芝提取物Ⅱ外，其他条件与实施例5相同。
对比例5
与实施例5相比，除了不添加油相紫芝提取物Ⅱ外，其他条件与实施例5相同。
对比例6
与实施例5相比，除了水相紫芝提取物Ⅱ的添加量改为7％外，其他条件与实施例5相同。
对比例7
与实施例5相比，除了油相紫芝提取物Ⅱ的添加量改为0.1％外，其他条件与实施例5相同。
提取率的对比测试
1.1多糖的提取
水相提取物中，以多糖的含量为标准判定提取率，紫芝提取物多糖的测定采用苯酚-硫酸比色法，以葡萄糖为标准品。
1.1.1标准样品溶液的配制
精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖对照品100mg，置于100mL容量瓶中，加水适量使溶解，定容；精密吸取上述溶液10mL，定容至100mL容量瓶中，即得100μg/m L的标准品溶液。
1.1.2标准曲线的制备
用移液管精密移取0.1mL、0.2mL、0.3mL、0.4mL、0.5mL、0.6mL、0.7mL的葡萄糖标准品溶液，分别置于10mL比色皿中，依次加水使成为2mL；另加1.0mL的5％的苯酚，摇匀，迅速滴加浓硫酸各5mL，摇匀，在室温显色20min，以空白校正零点，于489nm处检测其吸光度，得回归方程y＝1.17682x-0.05366，r＝0.99948；
多糖提取率(％)＝测量浓度×稀释倍数×提取液体积/原料干重×100％；
1.2三萜的提取
油相提取物中，以紫芝孢子油中三萜的含量为标准判定提取率，采用香草醛-高氯酸比色法和紫外分光光度法测定紫芝孢子油中的三萜含量；
1.2.1溶液配制
(1)香草醛-冰醋酸溶液(5％)
称取香草醛0.5g，加入冰醋酸稀释至10mL，溶解即可；
(2)齐墩果酸对照品溶液
精确称取10mg干燥至恒重的齐墩果酸对照品，甲醇定容至50mL，摇匀，得0.2mg/mL的齐墩果酸对照品溶液，将0.2mg/mL的齐墩果酸对照品溶液分别稀释，得0.04mg/mL、0.06mg/mL、0.08mg/mL、0.10mg/mL、0.12mg/mL、0.14mg/mL、0.16mg/mL的齐墩果酸对照品溶液；
(3)紫芝孢子油样品溶液
精确称取紫芝孢子油0/02g，加入无水乙醇70℃水浴加热，待其完全溶解后，冷却至室温，无水乙醇定容至100mL，待测；
1.2.2标准曲线旳制备
精密吸取0.04mg/mL、0.06mg/mL、0.08mg/mL、0.10mg/mL、0.12mg/mL、0.14mg/mL、0.16mg/mL的齐墩果酸对照品溶液，常压水浴蒸干溶剂；分别加入5％的香草醛-冰醋酸溶液0.20mL，高氯酸溶液0.8mL，涡旋混勾，70℃水浴加热15min，冷却。用移液管准确移取冰醋酸5.00mL稀释，摇匀；以试剂空白溶液为参比，30min内采用分光光度计545nm波长处测定吸光度值(A)，以三萜含量为横坐标x，吸光度为纵坐标y绘制标准曲线；
1.2.3样品含量的测定
取紫芝孢子油样品溶液0.02g，常压水浴蒸干溶剂，分别加入香草醛-冰醋酸溶液0.2mL，高氯酸溶液0.8mL，涡旋混匀，70℃水浴加热15min冷却比色，用移液管准确移取冰醋酸5.00mL稀释，摇匀，从标准曲线上查得相应含量，计算灵芝孢子油样品溶液中三蔽类物质的含量；
1.3提取率对比测试
表6提取率对比表
实验例 多糖提取率(％) 三萜提取率(％)
实施例1 2.21 19.86
实施例2 2.33 20.12
实施例3 2.01 19.88
对比例1 0.82 2.47
表6数据显示，本发明通过超声提取的紫芝提取物(水相)中的紫芝多糖提取率明显高于传统热水浸提法的提取率，通过脆化、粉粹和CO2超临界萃取的紫芝提取物(油相)中的三萜提取率明显高于酸化破壁、超声提取的提取率；本发明的操作工艺可有效缩短提取时间，便于扩大进行工艺生产，还可减少有害溶剂的使用；同时，整个提取过程中无需高温，避免了因高温对活性物分子结构的破坏，保持了紫芝的生物活性，是一种较理想的紫芝提取新工艺，有利于推广应用。
皮肤水分含量及皮肤水份流失(TEWL)的测试
2.1试样的配制
分别配制实施例4-11和对比例2-7共14种产品，进行下面实验；
2.2测试仪器
德国Courage+Khazaka公司(德国CK公司)制造的皮肤水份含量Corneometer测试仪和德国Courage+Khazaka公司(德国CK公司)制造的皮肤水份流失(TEWL)TewameterTM300测试探头；
2.3测试方法
水份测试采用的是世界公认的法—电容法，皮肤的电容量随着含水量的变化而变化，通过测量电容就可以测量出皮肤的水份含量；
使用皮肤水份测量仪对受试者靶部位皮肤进行皮肤含水量测定，通过比较样品使用前后及实施例侧和对比例侧皮肤含水量的变化来评估该样品的保湿功效；
皮肤水份流失TEWL对评估皮肤衰老的功能是非常重要的参数。随着皮肤的衰老，皮肤的保水能力逐渐降低，皮肤越容易干燥，皮肤水份流失TEWL的数值就越低。其测试原理来源于Fick菲克扩散定律：
2.4试验前期准备
选取熟龄衰老肌肤女性280名，年龄在45-55岁；随机分成7组，每组40。受试部位前15天不能使用任何产品(化妆品或外用药品或内服保健品)；试验前，要求受试者清洗清洗颜面部并在清洗后2小时进入温度2221℃，湿度5025％的恒温恒湿房间内静坐30min，并保持放松状态；
2.5颜面部水份含量及水份流失(TEWL)功效评估
实验中按随机表进行半边脸测试，一侧为一种产品，另一侧为另一种产品，14种产品分配给7组志愿者，选取志愿者的左右鼻唇沟部分进行皮肤水份含量测试及水份流失(TEWL)测试，取3个值的平均值作为鼻唇沟水份含量的数据(D0)及鼻唇沟皮肤水份流失(TEWL)的数据(D0)；测试结束后，志愿者需按要使用，一侧脸涂抹一种产品，另一侧脸涂抹另一种产品；使用时，使用右手涂抹右边颜面部，使用左手涂抹左边颜面部，禁止交叉污染并按要求每天早晚2次进行产品涂抹，连续试用28天，并要求试验的第14天(D14)及第28天(D28)进行回访；每个时间点的照明条件应保持一致：窗帘关闭、适当的照明；受试者在床躺着。床倾斜的角度在每个时间点都应该保持一致；床的位置必须在地面上标注，以确保D14和D28的位置的一致性；同一个志愿者的测试由同一个测量人员完成。
2.6实验结果
表7实验测试结果变化率单位(％)
由表7数据显示，人体半脸试验评价的结果能很明显的对比出实施例4-11和对比例2-7的功效差别，含组合物的面霜对皮肤保水能力的修复作用比空白样板更明显，其能有效的增加角质层水份含水量，减少皮肤角质层对外界的水份流失量，提升皮肤的滋润度和光滑度，有效的缓解皮肤衰老情况。
试验例3皮肤弹性指标的测试
3.1试样的配制
同试验例2。
3.2测试仪器
德国Courage+Khazaka公司(德国CK公司)制造的皮肤弹性测量仪(Cutometer@MPA580)和皮肤弹性测试探头(PVM600)；
3.3测试方法
受试者靶部位皮肤进行皮肤弹性指标R2，R5，R7作为皮肤弹性指标参数(R2是无负压时皮肤的回弹量Ua与有负压时最大拉伸量Uf之比；R5是皮肤测试时第一次循环过程中皮肤恢复过程的弹性部分Ur与加负压过程的弹性部分Ue之比；R7是皮肤测试时第一次循环过程中皮肤恢复过程的弹性部分Ur与这次循环过程中皮肤最大拉伸量Uf之比)，通过比较样品使用前后及实施例侧和对比例侧皮肤弹性指标的变化来评估该样品对皮肤弹性的改善功效。
测试原理是基于吸力和拉伸原理，在被测试的皮肤表面产生一个负压将皮肤吸进一个特定测试探头内，皮肤被吸进测试探头内的深度是通过一个非接触式的光学测试系统测得的，通过光的比率(发射光和接收光之比)同被吸入皮肤的深度成正比，这样就得到了一条皮肤被拉伸的长度和时间的关系曲线；
3.4试验前期准备
同试验例2。
3.5皮肤弹性指标的功效评价
实验中按随机表进行半边脸测试，一侧为一种产品，另一侧为另一种产品，选取志愿者的外侧眼角的垂直线和嘴角的水平线交叉点，使用皮肤弹性测量仪进行测量，共测量3次，取其平均值作为初始值(W0)；测试结束后，志愿者需按要使用，一侧脸涂抹一种产品，另一侧脸涂抹另一种产品。使用时，使用右手涂抹右边颜面部，使用左手涂抹左边颜面部，禁止交叉污染并按要求每天早晚2次进行产品涂抹，连续试用12周，并要求试验的第1周(W1)、第2周(W2)、第4周(W4)、第8周(W8)及第12周(W12)进行回访；每个时间点的照明条件应保持一致：窗帘关闭、适当的照明。受试者在床躺着。床倾斜的角度在每个时间点都应该保持一致，床的位置必须在地面上标注，以确保测试位置的一致性，同一个志愿者的测试由同一个测量人员完成。
3.6实验结果
表8实验测试皮肤弹性指标变化
试验例4皮肤纹理深浅指标的测试
4.1试样的配制
同试验例2；
4.2测试仪器
德国Courage+Khazaka公司(德国CK公司)制造的皮肤皱纹分析仪(Visioline⑩VL650-Quan-tiride)；
4.3测试方法
对受试者靶部位细小皱纹模型进行皮肤细纹深度和长度指标的分析；通过比较产品使用前后及实左右两侧侧皮肤细纹深度的变化来评估该样品对皮肤细纹的改善功效；
4.4试验前期准备
同试验例2；
4.5皮肤纹理深浅指标的功效评价
先用硅胶在眼角靶部位制成细小皱纹模型，实验中按随机表进行半边脸测试，一侧为一种产品，另一侧为另一种产品，使用皮肤皱纹分析仪进行分析作为初始值(W0)；测试结束后，志愿者需按要使用，一侧脸涂抹一种产品，另一侧脸涂抹另一种产品；使用时，使用右手涂抹右边颜面部，使用左手涂抹左边颜面部，禁止交叉污染并按要求每天早晚2次进行产品涂抹，连续试用12周，并要求试验的第1周(W1)、第2周(W2)、第4周(W4)、第8周(W8)及第12周(W12)进行回访；每个时间点的照明条件应保持一致：窗帘关闭、适当的照明。受试者在床躺着；床倾斜的角度在每个时间点都应该保持一致。床的位置必须在地面上标注，以确保测试位置的一致性；同一个志愿者的测试由同一个测量人员完成；
4.6实验结果
表9实验测试皮肤纹理深浅指标变化
W1 W2 W3 W4 W5
实施例4 3.8121.08 3.8121.06 3.8021.05 3.7921.02 3.7621.02
实施例5 3.8121.12 3.8121.10 3.8021.10 3.7921.12 3.7721.42
实施例6 3.8121.13 3.8121.11 3.8021.08 3.7921.11 3.7821.01
实施例7 3.8121.10 3.8121.10 3.8021.09 3.7921.10 3.7721.03
实施例8 3.8121.05 3.8121.04 3.8021.03 3.7921.08 3.7821.12
实施例9 3.8121.04 3.8121.03 3.8021.02 3.7921.07 3.7821.11
实施例10 3.8121.10 3.8121.10 3.8021.05 3.7921.07 3.7721.20
实施例11 3.8121.10 3.8121.09 3.8021.07 3.7921.08 3.7721.01
对比例2 3.8121.07 3.8121.07 3.8121.05 3.8121.05 3.8121.03
对比例3 3.8121.07 3.8121.07 3.8121.06 3.8121.04 3.8121.05
对比例4 3.8121.08 3.8121.07 3.8121.06 3.8121.05 3.8121.03
对比例5 3.8121.08 3.8121.08 3.8121.05 3.8121.04 3.8121.05
对比例6 3.8121.07 3.8121.07 3.8121.06 3.8121.05 3.8121.03
对比例7 3.8121.08 3.8121.07 3.8121.05 3.8121.04 3.8121.02
根据表8和表9数据显示，受试者使用实施例4-11后，皮肤弹性有较好的改善效果，且随着使用时间的延长，改善效果增强，各时间点较使用前有明显的改善；皮肤细小皱纹方面，随着使用时间的延长，也有一定程度改善，而对比例2-7由于缺少组分或配比超范围，对皮肤弹性和皱纹方面无明显改善，表明组合物中各组分缺一不可，而且在特定配比范围下才能发挥卓越功效。
试验例5人体感官评价测试
5.1实验方法
将实施例4和对比例2进行人体感官试用评价，连续使用12周，对使用样品过程中皮肤干燥度、皮肤弹性、皮肤光泽度、皮肤光滑度以及淡化细纹效果几个指标评价，统计不同使用阶段皮肤改善程度的人数百分比；
5.2实验结果
根据感官评价填写试用评价表，收集半脸实验试用评价表，统计结果见表10和表11：
表10实施例4人体试用感官评价指标改善统计(％)
评价结果 干燥度 弹性 光泽度 光滑度 细纹
W1 36.89 34.34 66.94 50.94 5.49
W4 66.15 46.58 80.64 67.28 9.75
W8 83.95 75.64 89.25 80.76 15.36
W12 92.77 90.57 95.71 90.63 20.17
表11对比例2人体试用感官评价指标改善统计(％)
评价结果 干燥度 弹性 光泽度 光滑度 细纹
W1 32.15 34.86 57.16 51.82 4.29
W4 31.92 36.84 58.44 54.59 4.06
W8 30.45 36.57 58.31 56.38 4.57
W12 29.66 37.10 59.28 55.76 4.89
由表10和表11的结果可见，在使用实施例4后第1周开始，受试者自评面部各指标(皮肤弹性、光滑度、光泽度、滋润度和皮肤纹理改善度)都有一定改善，随着使用时间的延长，各指标的总改善率逐渐提高，使用12周后，受试者使用产品后的自我感觉良好；但对比例2对各项指标没有显著改善，表明本发明含有紫芝提取物的BB霜的功效，可长效保持皮肤水分，缓解皮肤干燥，使皮肤柔滑细嫩；其还有淡化细纹，恢复肌肤弹性，增强皮肤的光泽度和光滑度的抗衰老功效，实施例5-11的感官评价效果与实施例4相似，由于数据量庞大，在此不再赘述。
综上所述，本发明通过优化提取工艺，各步骤各条件协同增效，分别高效提取出油相孢子油和水相灵芝多糖，优化两种提取物的组分配比，在特定配比下二者相互协同发挥卓越的抗衰老功效，可长效保持皮肤水分，缓解皮肤干燥，使皮肤柔滑细嫩；其还有淡化细纹，恢复肌肤弹性，增强皮肤的光泽度和光滑度的抗衰老功效。
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的详细方法，但本发明并不局限于上述详细方法，即不意味着本发明必须依赖上述详细方法才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。

Claims (10)

1.一种紫芝提取物的组合物，其特征在于，所述组合物包含水相紫芝提取物和油相紫芝提取物；
其中，所述水相紫芝提取物的重量份数为0.5-15份，所述油相紫芝提取物的重量份数为0.1-5份。
2.一种提取如权利要求1所述水相紫芝提取物的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)预处理：取紫芝子实体，粉碎过筛后待用；
(2)乙醇回流：将步骤(1)得到的粉末加入乙醇中进行回流提取，离心得到沉淀并干燥；
(3)超声提取：将步骤(2)得到的粉末加入水中进行超声提取，离心去除沉淀后浓缩滤液至滤液与初始紫芝粉末的重量比为1:(1-10)，得到水相紫芝提取物。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述过筛的目数为20-100目；
优选地，步骤(2)所述乙醇的体积浓度为50-95％；
优选地，步骤(2)所述回流提取的料液比为1:(1-10)；
优选地，步骤(2)所述回流提取的温度为40-70℃；
优选地，步骤(2)所述回流提取的次数为1-3次；
优选地，步骤(2)所述回流提取的时间为每次1-3小时；
优选地，步骤(2)所述干燥的温度为40-70℃；
优选地，步骤(3)所述超声的功率为200-800W；
优选地，步骤(3)所述超声提取的料液比为1:(10-20)；
优选地，步骤(3)所述超声提取的温度为30-60℃；
优选地，步骤(3)所述超声提取的时间为20-60分钟；
优选地，步骤(3)所述浓缩的温度为30-50℃。
4.一种提取如权利要求1所述油相紫芝提取物的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1’)取紫芝孢子，进行脆化破壁；
(2’)将步骤(1’)破壁后的孢子粉进行超微粉碎破壁后过筛；
(3’)将步骤(2’)得到的孢子粉进行超临界CO2萃取，收集得到油相紫芝提取物。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(1’)所述脆化破壁的蒸汽压力为0.4-0.6MPa；
优选地，步骤(1’)所述脆化破壁的蒸汽温度为80-100℃；
优选地，步骤(1’)所述脆化破壁的时间为0.5-1.5小时；
优选地，步骤(2’)所述超微粉碎的时间为30-60min；
优选地，步骤(2’)所述过筛的目数为80-200目；
优选地，步骤(3’)所述萃取的温度为20-50℃；
优选地，步骤(3’)所述萃取的压力为10-30MPa；
优选地，步骤(3’)所述萃取的时间为1-4小时；
优选地，步骤(3’)所述收集的CO2流量为5L/h-50L/h。
6.一种如权利要求1所述的紫芝提取物的组合物用于制备抗衰老化妆品的用途。
7.一种化妆品，其特征在于，所述化妆品含有如权利要求1所述的紫芝提取物的组合物；
优选地，所述化妆品包括乳液、面霜、粉底液、洁面乳、化妆水或BB霜中的任意一种或至少两种的组合，优选为BB霜。
8.根据权利要求7所述的化妆品，其特征在于，所述BB霜中紫芝提取物的组合物的重量百分比为1-15％。
9.根据权利要求7或8所述的化妆品，其特征在于，所述BB霜按重量份数包括润肤剂5-25份，保湿剂5-15份，乳化剂1-5份，增稠剂0.05-0.5份，稳定剂0.1-2份、粉质类2-10份和紫芝提取物的组合物2-10份。
10.根据权利要求9所述的化妆品，其特征在于，所述润肤油包括矿油、辛酸/癸酸甘油三酯、氢化聚异丁烯、碳酸二辛酯、鲸蜡醇乙基己酸酯、辛基聚甲基硅氧烷、异构十六烷、聚二甲基硅氧烷、环聚二甲基硅氧烷、环五聚二甲基硅氧烷或季戊四醇四异硬脂酸酯中的三种或三种以上的混合物；
优选地，所述乳化剂包括PEG-10聚二甲基硅氧烷、聚甘油-2二聚羟基硬脂酸酯、鲸蜡基PEG/PPG-10/1聚二甲基硅氧烷、PEG-30二聚羟基硬脂酸酯、聚甘油-3二异硬脂酸酯、聚甘油-2油酸酯或甘油异硬脂酸酯中的任意一种或至少两种的组合；
优选地，所述粉质类包括二氧化钛、氧化锌、云母、滑石粉、氧化铁黄、氧化铁红或氧化铁黑中的至少四种的组合；
优选地，所述稳定剂包括硫酸镁、氯化钠或硬脂酸镁中的任意一种或至少两种的组合；
优选地，所述保湿剂包括甘油、丁二醇、双丙甘醇、1，3-丙二醇、木糖醇、脱水木糖醇、甘油聚醚-26、透明质酸钠、海藻糖或甜菜碱中的任意一种或至少两种的组合；
优选地，所述胶质原料包括黄原胶、阿拉伯胶树胶、羟丙基淀粉磷酸酯、羧甲基纤维素、羟乙基纤维素或聚丙烯酸酯交联聚合物-6中的任意一种或至少两种的组合；
优选地，所述化妆品还包括皮肤调理剂、螯合剂、抗氧化剂、防腐剂或香精中的任意一种或至少两种的组合。
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